CART治疗复发难治型B细胞非霍奇金淋

美国西雅图弗雷德哈钦森癌症研究中心的CameronJ.T团队最近在ScienceTranslationalMedicine上发表了一项临床试验结果：在环磷酰胺(Cy)联合或者不联合氟达拉宾(Flu)为基础的淋巴清除性化疗(Cy/Flu或者Cy)后，将CD4+T细胞和CD8+T细胞以1：1的比例配方生产出标准一致的CAR-T细胞产品，用于治疗32位复发/难治型B细胞非霍奇金淋巴瘤(NHL)的患者。

接受Cy/Flu的病人与接受Cy的病人相比，CAR-T细胞的扩增和持久性明显增加，并且表现出更高的反应率[50%完全反应率(CR)，72%总体反应率(ORR)]，CR率在最大耐受剂量时为64%(82%ORR;n=11)。Cy/Flu减少了CAR结构中鼠源scFv引起的免疫反应，该反应限制了CAR-T细胞的扩增和CAR-T在临床上对仅接受Cy病人的治疗有效性。

严重的细胞因子释放症(sCRS)和≥3级的神经毒性分别在13%和28%的病人中出现。在该CAR-T细胞产品回输1天后，血清里的生物标记物浓度与后续的严重细胞因子释放症(sCRS)和神经毒性呈相关性。

按CD4+/CD8+T细胞比例进行配方生产的CD19CAR-T细胞免疫治疗可以确定影响CAR-T细胞扩增、持久性和毒性的相关因素，从而加速淋巴清除治疗方案的优化，以促进疾病反应和无进展生存期。

淋巴细胞清除性化疗，结合过继回输自体细胞制备的靶向CD19的CAR-T细胞，在难治性B细胞急性淋巴细胞白血病(B-ALL)表现出极高的完全反应率(CR);然而，对于难治性非霍奇金性淋巴瘤(NHL)的治疗效果却差强人意。

人类的CD4+和CD8+T细胞是T细胞的不同亚群，这两种细胞亚群在增殖、体内的持续性和在体外扩增后再过继回输的抗肿瘤效果均有所不同。临床前研究表明，来源于CD4+或者CD8+中央记忆T细胞(TCM)或者初始T细胞(TN)比来源于效应记忆T细胞(TEM)生产的CD19CAR-T细胞产品有更强的清除CD19+肿瘤的能力。通过固定CD4+/CD8+T细胞的比例配方形成的CAR-T细胞产品，比其中任一亚群或者不考虑亚群组成的T细胞产品效果更强。

CAR-T细胞亚群组成的不一致性在治疗NHL病人的临床试验中，对于辨别与CAR-T细胞的扩增、持久性、抗肿瘤反应的质量和持续能力，以及CAR-T细胞治疗毒性相关的因素是一个极大的挑战。通过固定亚群比例来进行基因修饰，能生产出更加统一的CAR-T细胞产品用于临床，使体内活性可重复，促进与有效性和毒性相关因素的鉴定。

B细胞恶性肿瘤病人的自体CAR-T细胞生产由于病人出现淋巴细胞减少症和T细胞增殖能力受损而面临巨大的挑战。在一些临床试验中，利用自体T细胞对于体外抗CD3/CD28磁珠刺激的增殖能力，来预测CD19CAR-T的生产质量，并确定病人可参与临床试验的资格。使用该方法，24%的B-ALL病人在临床试验被排除试验，NHL病人的排除比例更高，从75%至%，这取决于收集T细胞时病人疾病的状态。